灵芝三萜药理学作用研究进展

• 灵芝属担子纲菌, 多孔菌科植物, 灵芝属真菌的总称。据 《中国真菌志》记载, 我国灵芝有98种, 主要有赤芝, 紫芝, 薄 盖灵芝, 树舌芝, 云芝等{体育外围主词}。灵芝具有补中益气, 滋补强壮, 扶正 固本, 延年益寿等功效, 是一种珍贵的中药材{体育外围主词}。灵芝三萜 ( Ganoderma Triterpene,GT ) 是灵芝的主要成分之一, 迄今发 现的绝大多数均分离自赤芝, 目前各种灵芝中分离到的三萜 类化合物已达100多种[1]{体育外围主词}。过去的研究发现灵芝三萜具有如护 肝{体育外围主词}、抑制组胺释放{体育外围主词}、抗高血压{体育外围主词}、抗肿瘤、抗HIV-1及HIV-1蛋白 酶活性等广泛的药理活性。近几年, 除了对灵芝三萜已知药 理活性机制更深入研究外, 随着灵芝三萜很多新成分的提取 鉴定, 一些新的药理作用也被研究者们逐步发现, 本文主要 介绍近5年来灵芝三萜的药理学作用研究。 

  1 抗肿瘤 灵芝三萜对多种肿瘤细胞的生长和转移都有抑制作用。 分离自南方灵芝 ( Ganoderma australe) 的applanoxidic acid A , C,F和G可以抑制人早幼粒白血病细胞系 ( HL-60 cell line) 的繁殖与生长[2]。 Ganoderic acid T (GA-T)通过诱导细胞凋亡 和使细胞周期停滞在G1期, 可以显著抑制高转移性肺癌细胞 株(95-D) 的增殖, 线粒体功能异常和蛋白P53的表达可以介 导这种细胞凋亡的发生[3]{体育外围主词}{体育外围主词}。 ganoderic acid X( GAX) 可以抑制 拓扑异构酶IIa, 迅速地抑制HuH-7人肝癌细胞DNA合成, 同 时激活细胞外信号调节激酶 ( ERK) 和c-Jun氨基端激酶 ( JNK) 有丝分裂原(细胞分裂剂)激活蛋白激酶( mitogen-activated protein kinases)和细胞凋亡[4]{体育外围主词}。灵芝酸通过阻断人肝瘤细 胞株BEL7402细胞周期G1期向S期转变, 使细胞周期停滞从而抑制癌细胞的生长, 在浓度500 μ g/mL时, 其抑制率可以达 到70%, 但对正常人的肝细胞株L02并没有影响[5]。灵芝三萜可 以诱导HeLa cells轻微的G(0)-G(1) 期停滞, 蛋白质组学研究 显示它可以导致蛋白质14的可调节型表达, 蛋白质14对细胞 增殖, 细胞周期、凋亡和氧化应激起着重要的作用[6]。 Ganoderic acid D ( GAD) 亦可以诱导Hela人宫颈癌细胞G(2)/M 细胞周 期停滞和细胞凋亡{体育外围主词}{体育外围主词}。对GAD药物靶点网络的研究发现,GAD 的细胞毒作用和21蛋白的可调节表达有关, 相关分析显示 GAD可以结合14-3-3 蛋白家族, 膜联蛋白A5, 氨基肽酶B的6 个亚型{体育外围主词}{体育外围主词}。这21个蛋白质功能联系的强度研究显示其中的14个 和蛋白质相互作用网络密切相关, 它们既可以直接相互作 用, 也可以通过一个中间蛋白 ( 来自以往蛋白质相互作用的 实验结果) 相互联系, 这个网络被扩大到进一步外在的相互 作用, 它可以包含所有21个蛋白质[7]。含羟基的灵芝三萜物质 ganoderic acid A、 H{体育外围主词}、 F ( GA-A、 H、 F) 可能是治疗侵袭性乳腺癌 有前景的天然药物, 三者的活性与三萜类羊毛甾烷结构上的 C7,C15 (GA-A)/C3 (GA-H)的羟基化作用相关,GA-A和GA-F 可以同时抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的生长 ( 细胞的增殖 和集落的形成) 和其侵袭行为 ( 黏附, 迁移, 侵袭) {体育外围主词}。 GA-A和 GA-F是通过抑制转录因子AP-1和NF-kappaB来调节其生物 活性, 由此分别导致Cdk4的表达下调,uPA分泌受抑制[8]。

  2 抗微生物 2.1 抗结核杆菌 秦莲花等检测了灵芝提取物, 灵芝总多 糖, 灵芝总三萜以及4种三萜成分结核分枝杆菌 ( mycobacte rium tuberculosis,MTB) 标准菌株 (H37Rv) 和2株耐药菌株(557,594)的抑菌作用。研究发现灵芝对MTB具有抑菌作用, 而有效成分是灵芝三萜{体育外围主词}。当灵芝总三萜浓度为500 μ g/mL时, 对MTB的标准菌株和耐药菌株表现出明显的抑菌作用[9]。 2.2 抗病毒 灵芝酮 (Ganoderone )A,lucialdehyde B 和andergosta-7,22-dien-3a-ol 对单纯疱疹病毒有抑制作用[10]。 Ganodermadiol,lucidadiol和applanoxidic acid G可以对抗A型 流行病毒, 而Ganodermadiol 还显示了对1型人合胞体病毒 (HSV)的抗病毒活性[11]。 Lucidenic Acids P and Q, 赤芝酸甲酯 ( Methyl Lucidenate) P等对EB病毒亦有抑制作用[12]。 2.3 抗真菌 分离自长管灵芝 ( G.annulare) 的applanoxidic acid A,C和F可以抑制真菌狗小孢霉( Microsporum cannis) 和 须发藓菌(Trichophyton mentagrophytes)的生长[13]{体育外围主词}。 3 降血脂 灵芝醇A, 灵芝醇B, 灵芝醛A, 灵芝酸Y这类26-oxygenosterols物质具有抑制人肝细胞株合成胆固醇的生物效应, 灵芝 中氧合的固醇抑制胆固醇的生物合成是通过胆固醇的前体 醋酸或甲羟戊酸的转变实现的。羊毛脂甾醇14α - 脱甲基酶催 化24,25- 二氢羊毛脂甾醇生成胆固醇, 而26-oxygenosterols可 以抑制该酶的活性, 一些学者还认为这些氧合的固醇是胆固 醇合成的限速酶羟甲基戊二酰辅酶A ( HMG-CoA) 还原酶的 内源性调节器[14]{体育外围主词}。研究也证实灵芝三萜类物质中的7-oxo-ganoderic acid Z和15-hydroxy-ganoderic acid S确实可以抑制 HMG-CoA还原酶的活性{体育外围主词}。

  4 抗炎症反应 

  灵芝三萜中的某些化合物对由中性粒细胞等释放的炎 症介质有抑制作用{体育外围主词}。在哮喘的鼠模型中, 富含灵芝三萜的提 取物显著减弱了气道高反应性, 减少了总体粒细胞和嗜酸性 粒细胞的浸润, 减少了炎症介质的水平, 例如支气管肺泡灌 洗液中的IL-4, IL-5和嗜酸细胞活化趋化因子, 从而发挥抗 炎症反应作用, 减弱Th2介导的反应[16]。 3-oxo-5a-lanosta-8,24dien-21-oic acid可以显著抑制甲酰甲硫氨酰- 亮氨酰- 苯丙 氨酸( formyl-Met-Leu-Phe,fMLP) /细胞松弛素B(cytochalasin B,CB) 刺激中性粒细胞释放产生β - 葡萄糖醛酸酶,ganoderic aldehyde A,tsugaric acid A则可显著抑制fMLP/CB刺激中性粒 细胞形成超氧负离子的, 脂多糖/干扰素-γ刺激N9小神经胶 质细胞产生NO,3-oxo-5a-lanosta -8,24- dien-21-oic acid对 此益有潜在的抑制作用[17]。

   5 免疫调节

   灵芝醇F, 灵芝酮二醇, 灵芝酮三醇能有效地抑制补体激 活的经典途径[18]{体育外围主词}。灵芝酸能促使带lewis肺癌的Guinea猪体内 IL-2的含量上升, 并提高起NK细胞的免疫活性, 具有免疫促 进功能[19], 与后来Guan Wang等研究灵芝三萜中的单一化合 物Ganoderic acid Me (GA-Me) 的结果基本一致{体育外围主词}。他们发现 Ganoderic acid Me可增加IL-2、 IFN-γ的表达, 并且可以上调 和IL-2产生有关的Nuclear Factor-κ B ( NF-κ B)的表达[20]。 GT可 显著直接促进小鼠脾脏树突状细胞 ( dendritic cell,DC) 增殖, 虽然其刺激强度均明显低于细胞因子组, 但与单独使用细胞因子组相比, 不同浓度的GT加细胞因子对刺激小鼠脾脏DC 增殖有明显的协同作用。协同作用的机制可能是通过直接刺 激DC增殖, 或通过产生各种有利于促进DC增殖的细胞因子{体育外围主词}。 DC是目前发现的功能最强的专职抗原呈递细胞, 它对诱导初 次免疫应答及肿瘤抗原呈递具有独特的功能[21]{体育外围主词}{体育外围主词}。灵芝三萜通 过促使CD3、 CD4亚群细胞表达CD69和HLA—DR, 来促进T淋 巴细胞(CD3细胞)的活化[22]{体育外围主词}。 

  6 其他药理作用 

  五环三萜类化合物对大鼠阿霉素肾病模型所致的肾病 综合症的防治有相当的?；ぷ饔? 治疗6周后, 其生化结果、 光镜及电镜病理检查均得到明显改善[23]。灵芝三萜可通过抑 制5a-还原酶同工酶(1和2型)的活性来抑制大鼠前列腺增生[24], 还可改善D- 半乳糖 ( D-gal) 衰老模型小鼠的学习记忆能力, 具有促进智力和延缓衰老的作用[25]{体育外围主词}。

   7 小 结 

  从近年对灵芝三萜药理作用的研究, 可以发现它在灵芝 药效中起到的作用正在逐渐明确, 但是由于种类的多样性, 相对而言对灵芝三萜各单一化合物具体药理作用还未完全 明确{体育外围主词}。有悠久药用历史的灵芝是中医药学宝库中的珍品, 为 了使灵芝各单体的药理活性逐步明确, 以便为将来临床药用 提供更多的理论依据, 因此对灵芝三萜类化合物的成分和药 理作用的研究仍需进一步的深入。